藻类种子培养步骤

一.材料和方法

1.培养容器的选择和预处理:选用容积为20 ~ 100升的透明塑料袋作为培养容器,使用前在漂白粉溶液中浸泡24小时,然后在阳光下暴晒12小时;塑料袋可以是藻类培养专用塑料袋,也可以是虾苗或鱼苗运输用袋。

2.培养液的制备培养液由基本培养基、葡萄糖和水组成。基础培养基可以是BG11培养基、f/2培养基或复合肥培养基,其中BG11和f/2为常用藻类培养基,复合肥为俄罗斯阿库福合肥(n ∶ p ∶ k = 16 ∶ 16 ∶ 65438)。葡萄糖的添加量为每升培养液0.5 ~ 1g,可以为小球藻的生长提供条件,使小球藻在有光或无光的自然条件下都能生长,同时可以弥补单纯使用无机营养物培养小球藻造成的营养失衡。

3.培养菌种和接种培养菌种为小球藻。接种到培养容器中的藻类为处于指数生长期的小球藻。将处理过的培养容器用培养液填充至其体积的50%,并在9: 00-11: 00接种小球藻。接种的小球藻藻液温度与培养液温度基本相同,接种量约为总培养量的65438±00%。接种后,在65438±00℃以上的温度下密封培养容器,进行混合营养培养。封口时,藻类培养专用塑料袋用密封盖封口,虾苗鱼苗用尼龙袋用橡皮筋封口。自然光用于照明。温度较低时,最好将培养容器放在玻璃阳光房或塑料大棚中培养。

4.日常管理接种完成后,将培养容器整齐地放在铺有白瓦的地面上,每天至少摇动培养容器4次,观察培养容器内藻类的生长情况,用紫外分光光度计测量藻液的光密度(OD)值。通常从接种的第二天开始,塑料袋中的溶液颜色变得稍浓并产生小气泡,说明小球藻生长正常。接种两天后,如果袋内颜色没有变化或没有产生气泡,颜色呈灰黄色,说明接种失败,应及时废弃清洗。当培养容器中的藻液变成深绿色时,可以接种到其他藻类培养容器中,接种方法同上述方法。如果有足够的藻类物种,培养的藻类可以用于培养轮虫、枝角类和鱼苗或虾。使用过的培养容器和塑料袋,在保证不被损坏的前提下,用漂白粉溶液消毒后,才能用于下一次培养。

第二,结果

1.20L平面藻培养袋培养在20L平面藻培养袋中,以BG11为基础藻培养基,葡萄糖添加量为1g/L,培养小球藻。接种量为65438±00%,培养体积为65438±00L。接种后,开始培养小球藻。培养4天后,藻的OD值为1.201,细胞密度为1.83524万个细胞/ml,细胞干重为0.25mg/ml。以f/2为藻类基础培养基,添加葡萄糖1g/L,培养小球藻。接种量为10%,培养体积为10l,接种后初始OD值为0.091,培养4天后藻类OD值为0.974,细胞干重od值为0.20mg/ml。以复合肥培养基为藻类基础培养基,复合肥添加量为1g/L,然后葡萄糖为1g/L,进行小球藻培养。接种量为10%,培养体积为10l,接种后初始OD值为0.091,培养四天后藻类OD值为0.6438+0。